Identification d'anticorps pouvant protéger contre le virus de la grippe

Muscade · #1 February 22nd, 2009, 01:49 PM

Identification d'anticorps pouvant protéger contre le virus de la grippe

PARIS - Des chercheurs ont réussi à identifier des anticorps humains recréés en laboratoire susceptibles de protéger des souris contre des doses mortelles de différentes souches du virus de la grippe, y compris celui de la grippe aviaire, le virus H5N1.

Ces anticorps monoclonaux, dérivés d'une même lignée cellulaire, pourraient être utilisés en combinaison avec des médicaments antiviraux pour prévenir ou traiter une épidémie de grippe, estiment les chercheurs, dont les travaux sont publiés dimanche en ligne par la revue Nature Structural and Molecular Biology. La grippe saisonnière tue plus de 250.000 personnes par an dans le monde.

Après une maladie ou une vaccination, le corps produit des anticorps pour se protéger contre une future attaque du virus, lesquels en général ne neutralisent que la souche du virus à l'origine de l'infection.

Wayne Marasco, professeur associé à l'Ecole de médecine de Harvard, et son équipe ont réussi à identifier des anticorps à champ large actifs contre une protéine appelée hémagglutinine (HA), responsable de la fixation du virus à la cellule.

Les chercheurs ont travaillé sur des dizaines de milliards d'anticorps synthétiques et en ont trouvé dix actifs contre les quatre souches majeures du virus H5N1. Trois de ces anticorps, testés chez des souris, étaient actifs contre d'autres virus de la grippe.

"Cette découverte est riche en promesses considérables", a estimé Anthony Fauci, directeur de l'Institut américain pour les maladies allergiques et infections, qui fait partie du NIH (National institute of health).

Selon lui, en cas d'épidémie, "des anticorps humains monoclonaux pourraient constituer un complément important aux antiviraux pour contenir la pandémie, en attendant qu'un vaccin soit disponible".

Les chercheurs veulent maintenant tester les anticorps sur les furets, le modèle animal parfait en ce qui concerne la grippe. Il s'agira ensuite de développer une version clinique d'un anticorps, ce qui pourrait amener d'ici quelques années au développement d'un produit sous licence, pour autant que les anticorps s'avèrent sûrs et efficaces.

(©AFP / 22 février 2009 19h00)

http://www.romandie.com/ats/news/090...9.7j3m3iym.asp

lili · #2 February 24th, 2009, 02:36 AM

Article abstract

Nature Structural & Molecular Biology
Published online: 22 February 2009 | doi:10.1038/nsmb.1566
Structural and functional bases for broad-spectrum neutralization of avian and human influenza A viruses

Jianhua Sui^1,⁴, William C Hwang^2,⁴, Sandra Perez³, Ge Wei², Daniel Aird¹, Li-mei Chen³, Eugenio Santelli², Boguslaw Stec², Greg Cadwell², Maryam Ali¹, Hongquan Wan³, Akikazu Murakami¹, Anuradha Yammanuru¹, Thomas Han¹, Nancy J Cox³, Laurie A Bankston², Ruben O Donis³, Robert C Liddington² & Wayne A Marasco¹

Abstract

Influenza virus remains a serious health threat, owing to its ability to evade immune surveillance through rapid genetic drift and reassortment. Here we used a human non-immune antibody phage-display library and the H5 hemagglutinin ectodomain to select ten neutralizing antibodies (nAbs) that were effective against all group 1 influenza viruses tested, including H5N1 'bird flu' and the H1N1 'Spanish flu'. The crystal structure of one such nAb bound to H5 shows that it blocks infection by inserting its heavy chain into a conserved pocket in the stem region, thus preventing membrane fusion. Nine of the nAbs employ the germline gene VH1-69, and all seem to use the same neutralizing mechanism. Our data further suggest that this region is recalcitrant to neutralization escape and that nAb-based immunotherapy is a promising strategy for broad-spectrum protection against seasonal and pandemic influenza viruses.

Top of page

Department of Cancer Immunology & AIDS, Dana-Farber Cancer Institute; Department of Medicine, Harvard Medical School, 44 Binney Street JFB 826, Boston, Massachusetts 02115, USA.
Infectious and Inflammatory Disease Center, Burnham Institute for Medical Research, 10901 North Torrey Pines Road, La Jolla, California 92037, USA.
Influenza Division, Centers for Disease Control and Prevention, National Center for Immunization and Respiratory Diseases, 1600 Clifton Road, Mail Stop G-16, Atlanta, Georgia 30333, USA.
These authors contributed equally to this work.

Correspondence to: Jianhua Sui^1,⁴ e-mail: jianhua_sui@dfci.harvard.edu
Correspondence to: Ruben O Donis³ e-mail: rvd6@cdc.gov
Correspondence to: Robert C Liddington² e-mail: rlidding@burnham.org
Correspondence to: Wayne A Marasco¹ e-mail: wayne_marasco@dfci.harvard.edu

http://www.nature.com/nsmb/journal/v...nsmb.1566.html

Traduction machine

Le virus de grippe reste une menace sérieuse de santé, dû à sa capacité d'éluder la surveillance immunisée par la dérive génétique et le reassortment rapides. Ici nous avons employé un anticorps non-immune humain bactériophage-montrons la bibliothèque et l'ectodomain du hemagglutinin H5 pour choisir dix anticorps neutralisants (attrape) qui étaient efficaces contre tous les virus de grippe du groupe 1 examinés, y compris H5N1 ' ; oiseau flu' ; et le H1N1 ' ; Flu' espagnol ;. La structure cristalline d'une que telles attrapent la limite à H5 montre qu'elle bloque l'infection en insérant sa chaîne lourde dans une poche conservée dans la région de tige, de ce fait empêcher la fusion de membrane. Neuf de attrape utilisent le gène VH1-69 de germline, et tous semblent employer le même mécanisme neutralisant. Nos données autres suggèrent que cette région soit récalcitrante à l'évasion de neutralisation et que l'immunothérapie attraper-basée est une stratégie prometteuse pour la protection de large-spectre contre les virus de grippe saisonniers et universels.

lili · #3 February 24th, 2009, 07:30 AM

Grippe, vers un traitement universel ?

NOUVELOBS.COM | 24.02.2009 | 11:14
Des chercheurs ont isolé des protéines, recrées en laboratoires, capables de neutraliser plusieurs souches différentes de grippe saisonnière ainsi que les virus pouvant provoquer des pandémies comme celui de la grippe aviaire.

Représentation simplifiée de l'hemagglutinine neutralisée par des anticorps.Credit: William C. Hwang.

Le problème avec le virus de la grippe, est sa capacité à muter très rapidement. En fait il n’existe pas un seul virus mais trois Myxovirus influenzae : A, B et C. Si bien que chaque année c’est un virus légèrement différent qui part à l’assaut de nos organismes. Du coup, les spécialistes de l’immunité sont obligés de fabriquer tous les ans un nouveau vaccin à partir des souches identifiées par l’OMS. Du fait de la grande variabilité des virus de la grippe, il semble en effet difficile de fabriquer un vaccin universel valable pour toutes les souches. En revanche, plusieurs équipe travaille à la mise au point d’un « traitement d’urgence » capable de contenir un début de pandémie, notamment de grippe aviaire, et donc efficace sur différents variants.

Dans cette optique les travaux de Wayne Marasco, publiés en ligne par la revue Nature Structural and Molecular Biology, revêtent une importance particulière. Ce chercheur issu de l'Ecole de médecine de Harvard a réussi à isoler une petite famille de protéines capables de neutraliser un large éventail de virus grippaux A, dont le virus de la grippe aviaire H5N1 et le H1N1 responsable de grippe espagnole.

Ces protéines sont en fait des anticorps dits monoclonaux car ils dérivent d’une même lignée cellulaire. Ils agissent, et c’est une découverte aussi, en empêchant le virus de changer de forme, sans cette métamorphose celui-ci ne peut pénétrer dans les cellules. Pour ce faire, ces anticorps se lient à une protéine qui se trouve à la surface du virus de la grippe appelée hémagglutinine (HA). Or l’HA a une structure génétique relativement stable d’une souche à l’autre ce qui rend ces anticorps efficaces contre plusieurs souches.

Parmi la dizaine de milliards d’anticorps synthétiques testés seuls trois ont été retenus. En culture, ils ont neutralisé le H5N1 et ils ont été actifs in vivo sur des souris contre différentes souches de type A. Les chercheurs veulent maintenant tester les anticorps sur d’autres modèles animaux. Si leur efficacité se confirme, les médecins pourront alors s’atteler à la mise au point d’un médicament.

Malgré la disponibilité du vaccin et depuis peu de traitements antigrippaux, la grippe tue encore plus de 250 000 personnes dans le monde chaque année. Au cours des flambées de grippe saisonnière, les anticorps monoclonaux pourraient être utilisés pour traiter les personnes présentant une altération de l'immunité due à des conditions médicales préexistantes ou d'âge avancé. Dans le cas d'une pandémie de grippe, ces personnes à risque ainsi que d'autres (par exemple, les premiers intervenants et le personnel médical) pourraient également bénéficier de ce type de traitement.

J.I.
Sciences-et-Avenir.com
24/02/2009

http://tempsreel.nouvelobs.com/actua...niversel_.html

lili · #4 February 24th, 2009, 07:41 AM

Des travaux sur les anticorps monoclonaux:

http://www.flutrackers.com/forum/showthread.php?t=66824

lili · #5 February 25th, 2009, 01:56 AM

Une puissante activité contre H5N1 et H1N1

Des anticorps neutralisants contre le virus de la grippe

Jianhua Sui, A.Marasco et coll. (Harvard) ont appliqué des méthodologies in vitro pour étudier les anticorps humains neutralisants (Acn) contre l’hémagglutinine des souches de virus Influenza, responsables de différentes formes de grippe. Ils ont isolé 3 Acn qui possèdent une puissante efficacité in vitro et in vivo contre des souches de virus influenza H5N1 et H1N1 hautement pathogènes. Ces Acn possèdent une activité croisée contre différents sous-types de virus H1 et H5.

« CES RÉSULTATS donnent l’espoir de mettre au point une stratégie efficace contre les virus influenza hautement pathogènes, en associant un petit groupe d’anticorps neutralisants dirigés contre les deux groupes de virus les plus fréquents avec des médicaments antiviraux », indiquent les auteurs.
Le virus influenza A est sous-classé par ses deux protéines de surface majeures : l’hémagglutinine et la neuramidase. L’hémagglutinine est médiatrice de l’entrée du virus dans la cellule : reconnaissance d’un épitope de la cellule qu’il va infecter ; puis attachement ; puis fusion des membranes virale et cellulaire ; puis endocytose ; enfin, entrée de l’ARN viral dans le cytoplasme.

Survivants de l’infection par le H5N1.

Sui, Marasco et coll. ont utilisé une librairie d’anticorps humains prélevés dans une population de survivants de l’infection par le H5N1. Ils ont testé l’efficacité d’un très grand nombre de ces anticorps contre des virus influenza connus pour leur virulence, tel le H5N1 (grippe aviaire) et le H1N1 (grippe espagnole). Ils en ont isolé trois capables de neutraliser à la fois des souches H1 et H5.
La démonstration est réalisée in vitro, puis in vivo chez des modèles de souris infectées par H5N1 : un effet significatif de prévention de la dissémination systémique du virus est relevé chez les animaux, une réduction de la mortalité et les souris survivantes sont restées en bonne santé.
L’effet de neutralisation croisée a été étudié plus avant et une explication a été trouvée. Les études de cristallographie ont montré que ces Acn se lient à un épitope commun aux différentes souches. Et que cet épitope se trouve dans une poche d’une région de l’hémagglutinine qui contient le peptide de fusion. Aussi, présument les auteurs, « on suppose que ces Acn agissent en inhibant la fusion des membranes entre elles plutôt qu’en bloquant l’attachement ».
Ils inhibent le processus de fusion post-attachement en reconnaissant un épitope hautement conservé. Situé, selon les observations initiales, dans un endroit protégé des changements conformationnels qui président aux mutations virales, qui permettent au virus d’échapper à la majorité des anticorps neutralisants.

Un croisement sans précédent de neutralisation.

Les auteurs évoquent « un croisement sans précédent de neutralisation » pour ces deux sous-types d’hémagglutinines. Mais qui n’est pas retrouvé toutefois lorsque d’autres sous-types moins fréquents sont testés : H3, H7 (les Acn isolés ne provoquent pas de neutralisation). Des différentes structurales en dépit des similitudes de séquences peuvent expliquer cela. Les auteurs continuent à appliquer la méthode productrice de résultats qu’ils ont décrite dans leur publication.

Dr BÉATRICE VUAILLE

Nature Structural & Molecular Biology, publication avancée en ligne.

Le Quotidien du Médecin du : 25/02/2009

http://www.quotimed.com/journal/inde...DartIdx=423113

lili · #6 February 26th, 2009, 04:43 AM

L’analyse structurale précise de l’hémagglutinine ouvre de nouvelles perspectives thérapeutiques

Une équipe de chercheurs américains [1] vient d’identifier des anticorps monoclonaux humains capables de neutraliser différents virus influenza A dont le virus H1N1 de la grippe saisonnière, le virus aviaire H5N1 et le virus de la grippe espagnole, in vitro et in vivo. Ils ont en effet mis en évidence une zone structurale de l’hémagglutinine stable et hautement conservée sur laquelle ces anticorps viendraient se fixer. Cette découverte ouvre de larges perspectives pour le traitement et la prévention des épidémies grippales saisonnières ou d’une possible pandémie. Voir en ligne : Structural and functional bases for broad-spectrum neutralization of avian and human influenza A viruses

[1] Jianhua Sui, William C Hwang, Sandra Perez, Ge Wei, Daniel Aird, Li-mei Chen, Eugenio Santelli, Boguslaw Stec, Greg Cadwell, Maryam Ali, Hongquan Wan, Akikazu Murakami, Anuradha Yammanuru, Thomas Han, Nancy J Cox, Laurie A Bankston, Ruben O Donis, Robert C Liddington & Wayne A Marasco. « Structural and functional bases for broad-spectrum neutralization of avian and human influenza A viruses ». Nature Structural & Molecular Biology [En ligne] (22 février 2009). http://www.nature.com/nsmb/journal/v...nsmb.1566.html (page consultée le 26 février 2009)

http://grippeaviaire.veille.inist.fr/spip.php?breve522

lili · #7 March 2nd, 2009, 02:02 AM

Un anticorps neutralise plusieurs virus A

Sur la piste d’un vaccin grippal universel

A l'instar de Sui et coll. (« Quotidien » du 25 février 2009), l'équipe de Ekiert, Wilson et coll. montre, grâce à une étude de cristallographie, qu'un anticorps (isolé chez un individu vacciné), capable de neutraliser de multiples sous-types de virus influenza (dont H1, H2, H5, H6, H8 et H9), se fixe à un épitope hautement conservé sur l'hémaglutinine des virus H1N1 et H5N1. Il bloque ainsi la fusion des membranes, empêchant l'entrée du virus dans les cellules humaines. Cette identification procure une piste de développement d’anticorps thérapeutiques ainsi que d'un vaccin « universel » contre la grippe A, la seule responsable de pandémies.

LE VIRUS INFLUENZA A est classé selon ses deux protéines de surface : l’hémagglutinine (H) et la neuramidase (N). C'est par l'hémagglutinine qu’il se lie spécifiquement à la surface d'une cellule (liaison, puis fusion des membranes virale et cellulaire, enfin entrée de l’ARN viral dans le cytoplasme). Les anticorps anti-H neutralisent le virus et protègent donc l'individu.
Chaque virus pandémique s'est développé, au moins en partie, à partir d'un virus influenza aviaire, soit par transmission interespèce directe, soit par échange de matériel génétique entre des virus aviaires et humains. Dans chaque cas, il s'est produit un changement brutal et complet (cassure) de l'hémagglutinine, issue du vaste réservoir des 16 sous-types H des virus aviaires. Personne n'était donc immunisé contre ce nouveau sous-type antigénique.

Contre un épitope conservé.

Des anticorps de haute affinité contre un épitope conservé pourraient procurer une immunité contre les divers sous-types de virus grippal et une protection contre les futurs virus pandémiques. Si de rares anticorps à large spectre de neutralisation ont été décrits, leurs épitopes restaient obscurs, entravant le développement d'un vaccin universel.
L'équipe de Ian Wilson (Scripps Research Institute, La Jolla) s'est intéressée à un anticorps, CR6261, isolé chez un individu vacciné, capable de neutraliser de multiples sous-types de virus influenza (dont H1, H2, H5, H6, H8 et H9). Cet Ac a également protégé des souris contre les virus H1N1 (grippe espagnole) et H5N1 (grippe aviaire) lorsqu'il était administré jusqu'à 5 jours après l'infection.
Ils ont déterminé les structures cristallines de CR6261 formant un complexe avec l'hémagglutinine de H1N1 ou de H5N1 (d'un cas létal récent de grippe aviaire). Ils ont constaté que l'Ac CR6261 reconnaît une région hélicoïdale hautement conservée de l’hémagglutinine. Cet Ac neutralise le virus en bloquant les réarrangements de conformation associés à la fusion des membranes.

Le traitement et la prévention.

« Nous définissons par conséquent, sans équivoque, l'épitope conservé dans différents sous-types de virus de la grippe », explique au « Quotidien » le Dr Ian Wilson. « L'anticorps CR6261 peut déjà avoir une grande utilité dans le traitement et la prévention des infections par les virus grippaux, y compris la grippe aviaire.»
« La découverte d'un épitope hautement conservé dans différents sous-types de virus grippaux suggère des stratégies possibles pour développer un vaccin grippal universel… La prochaine étape sera d'utiliser les résultats structurels pour développer de tels immunogènes pouvant constituer des candidats vaccins ».
« Trois équipes*, de façon indépendante, ont produit de tels anticorps et ont démontré, de ce fait, la généralité de ces résultats. Ces récentes études définissent le site de liaison et nous présumons à partir des deux récents résultats structurels, le notre et celui de Sui et coll., que tous ces différents anticorps reconnaissent probablement le même épitope conservé ».

› VERONIQUE NGUYEN

« Sciencexpress », 26 février 2009, Ekiert et coll.
* avec Sui et coll. dans « Nature Structural & Molecular Biology » 2009 et Kashyap et coll. dans ?PNAS» 105, 22 avril 2008.

Le Quotidien du Médecin du : 02/03/2009

http://www.quotimed.com/journal/inde...DartIdx=423254

Published Online February 26, 2009
Science DOI: 10.1126/science.1171491

Science Express Index

Reports

Submitted on January 27, 2009
Accepted on February 19, 2009

Antibody Recognition of a Highly Conserved Influenza Virus Epitope

Damian C. Ekiert ¹, Gira Bhabha ¹, Marc-André Elsliger ¹, Robert H. E. Friesen ², Mandy Jongeneelen ², Mark Throsby ², Jaap Goudsmit ², Ian A. Wilson ³^* ¹ Department of Molecular Biology, The Scripps Research Institute, 10550 North Torrey Pines Road, La Jolla, CA 92037, USA.
² Crucell Holland BV, Archimedesweg 4-6, 2301 CA Leiden, The Netherlands.
³ Department of Molecular Biology, The Scripps Research Institute, 10550 North Torrey Pines Road, La Jolla, CA 92037, USA.; The Skaggs Institute for Chemical Biology, The Scripps Research Institute, 10550 North Torrey Pines Road, La Jolla, CA 92037, USA.

^* To whom correspondence should be addressed.
Ian A. Wilson , E-mail: wilson@scripps.edu

Influenza virus presents a significant and persistent threatto public health worldwide, and current vaccines provide immunityto viral isolates similar to the vaccine strain. High-affinityantibodies against a conserved epitope could provide immunityto the diverse influenza subtypes and protection against futurepandemic viruses. Co-crystal structures were determined at 2.2and 2.7 Å resolutions for broadly neutralizing human antibodyCR6261 Fab in complexes with the major surface antigen (hemagglutinin,HA) from viruses responsible for the 1918 H1N1 influenza pandemicand a recent lethal case of H5N1 avian influenza. In contrastto other structurally characterized influenza antibodies, CR6261recognizes a highly conserved helical region in the membrane-proximalstem of HA1/HA2. The antibody neutralizes the virus by blockingconformational rearrangements associated with membrane fusion.The CR6261 epitope identified here should accelerate the designand implementation of improved vaccines that can elicit CR6261-likeantibodies, as well as antibody-based therapies for the treatmentof influenza.

http://www.sciencemag.org/cgi/content/abstract/1171491